新しい相互作用検出系FlimPIA

　我々は，ホタル発光酵素の反応機構解析をもとに，各反応の変異体同士の機能的相補という全く新しい原理を元にした，迅速高感度な分子間相互作用検出系FlimPIA (Firefly luminescent intermediate-based protein-protein interaction assay)を構築しました。FRETやPCAなどの従来法に比べ，細胞内外，特に試験管内で高い性能を発揮する特徴があります。

現在，本法を利用した相互作用検出，ならびにそれを阻害する薬剤スクリーニングなどの共同研究者を募集しています。

プレスリリース
JSTプレスリリース / 東工大プレスリリース　

報道
日経バイオテク

References

1) Y. Ohmuro-Matsuyama, K. Nakano, A. Kimura, K. Ayabe, M. Ihara, T. Wada and H. Ueda "A protein-protein interaction assay based on the functional complementation of mutant firefly luciferases" Anal. Chem. 85, 7935-7940 (2013).

2) Y. Ohmuro-Matsuyama, K. Gomi, T. Shimoda, H. Yamaji and H. Ueda "Improving the stability of protein–protein interaction assay FlimPIA using a thermostabilized firefly luciferase" Front. Bioeng. Biotechnol. 9, 778120 (2021). [DOI]

*この開発研究は，JSTの産学イノベーション加速事業【先端計測分析技術・機器開発】による支援を受けて行われました。

史上最小の発光酵素picALuc

　これまでの発光酵素は小さくても19kD程度の大きさがあり，例えばタンパク質間相互作用に影響を与える可能性がありました。我々は，産総研の金誠培研究員が開発したALucを短縮化することで，その明るさを保ちつつ13kDまで短縮することに成功しました。



プレスリリース
東工大プレスリリース　

報道
日経バイオテク，日刊工業新聞

References

1) Y. Ohmuro-Matsuyama, T. Furuta, H. Matsui, M. Kanai and H. Ueda "Miniaturization of the bright light-emitting luciferase ALuc: picALuc" ACS Chem. Biol. 17, 864-872 (2022). [DOI]